Biologie

Western Blot – Was ist das? Eine Definition

Ein Western Blot oder Immunoblot ist eine molekularbiologische Methode, mit der spezifische Proteine auf einer Membran nachgewiesen werden können.

Die Technik besteht aus mehreren Schritten:

  • western blot 300x169 - Western Blot - Was ist das? Eine DefinitionProteinproben werden auf ein Elektrophoresegel aufgetragen und nach ihrem Molekulargewicht getrennt. Dazu wird ein elektrischer Strom durch das Gel geleitet. Je größer die Proteine sind, desto langsamer wandern sie.
  • Sobald die Proteine gewandert sind, werden sie auf eine Membran übertragen, die aus Nitrozellulose oder Polyvinylidenfluorid (PVDF) bestehen kann. Die Bindung der Proteine an die Membran erfolgt durch hydrophobe und ionische Wechselwirkungen zwischen der Membran und den Proteinen.
  • Blockierung der Membran: Dieser Schritt ist unerlässlich, um spätere unspezifische Wechselwirkungen zwischen den Antikörpern und der Membran zu begrenzen. Die Blockierung wird in einer konzentrierten Proteinlösung durchgeführt.
  • Nachweis: Das Prinzip besteht darin, markierte Antikörper, die für die zu beobachtenden Proteine spezifisch sind, auf die Membran aufzubringen. Auf diese Weise kann man ihre Position auf dem Gel beobachten.

Western Blots werden in Forschungslabors, die sich mit den Rollen von Proteinen beschäftigen, häufig eingesetzt. Im medizinischen Bereich werden sie bei der Diagnose bestimmter Krankheiten eingesetzt. HIV-Bestätigungstests verwenden diese Technologie, um einen HIV-Antikörper in einer Serumprobe nachzuweisen.

Urhebender Autor: Redaktion Futura

Teile diesen Beitrag:
Parasympathikus - Was ist das? Eine Definition

Parasympathikus – Was ist das? Eine Definition

Mehr erfahren
Thymus - Was ist das? Eine Definition

Thymus – Was ist das? Eine Definition

Mehr erfahren